Seguimos con la segunda clase de Bacteriología Básica, en esta oportunidad la interrogante que me surgió al escribir la primera clase fue ''¿Realmente las bacterias son invisibles?'', hoy le daremos una respuesta a esta pregunta.

_{Fotografía de mi Galería personal.}

Espero poder explicarme lo mejor posible.

Las bacterias suelen ser muy microscópicas, tanto que debemos utilizar tinciones especiales para poder distinguirlas o diferenciar de otras. Las bacterias se pueden encontrar en cualquier superficie u objeto, ahora ¿Las puedes ver macrocopicamente?

Lógicamente no podemos ver a las bacterias, si no estaríamos todo el día intentando evitar superficies contaminadas. Una de las tinciones más usadas en Bacteriología es la tinción de Gram desarrollada por Christian Gram.

_{Coloración de Gram, Fotografía de mi Galería personal.}

Esta tincion busca dividir dos grandes grupos de bacterias, las Gram Positivas y las Gram Negativas. Pero para entenderla mejor debemos conocer que la pared bacteriana juega el papel fundamental en esta coloración (tinción) ya que dependiendo de los componentes que tenga la pared de la bacteria se va a colorar de Morado Intenso o Rosado.

Pared Bacteriana

Entonces si nos vamos a la morfología de las bacterias, podemos notar que todas ellas están delimitadas microscopicamente por una pared bacteriana. Ahora entremos un poco más en materia y digamos los componentes de las bacterias.

• Gram positivas: Las bacterias gram positivas son aquellas que logran retener el colorante primario de la coloración, pero esto solo se debe a la composición de su pared, su pared está compuesta por ácidos teicoicos, acidos lipoteicoicos, una membrana plasmática y de igual forma una capa gruesa de peptidoglicano.

_{Gram positivas, Fotografía de mi Galería personal.}

Esta porción gruesa de peptidoglicano hace que la bacteria pueda retener el colorante primario y que no lo deje salir.

• Gram negativas: Por otro lado la pared de las bacterias gram negativas tiene Lipopolisacaridos, Lipoproteinas, Fosfolipidos y una capa delgada de peptidoglicano que permite el escape del colorante primario.

_{Gram negativas, Fotografía de mi Galería personal.}

Es decir, si la bacteria no tiene la capa de peptidoglicano gruesa entonces no podrá retener el color primario y por lo tanto será una bacteria Gram Negativa.

Entendiendo esto podemos pasar a la segunda parte de esta lección la cual forma parte de la práctica de laboratorio.

Procedimiento de la Tinción de Gram

Ahora que sabemos como están compuestas la pared bacteriana de los dos grandes grupos más importantes entonces vamos por la tinción de Gram, esta consiste en utilizar ciertos materiales para lograr la diferenciación entre ambos grupos que acabo de mencionar.

Utilizamos un colorante primario, un mordiente, un decolorante y un colorante secundario. El colorante primero va a teñir las bacterias gram positivas, el lugol hará el efecto de mordiente aumentando la fijación del color a la célula, el decolorante suele ser etanol para eliminar el rastro de color mientras que el colorante secundario entra en acción al no colorear la pared de peptidoglicanos.

_{Cristal Violeta, Fotografía de mi Galería personal.}

• Lo primero que haremos será tomar el cultivo que realizamos con la muestra del paciente y hacer un frotis como si de sangre se tratara.

• El colorante primario será el cristal violeta, este será añadido al frotis con el objetivo de obtener la primera tinción. Solo bastará unas cuantas gotas por solo 30 segundos.

• Al quitar el exceso de Cristal Violeta añadiremos el mordiente que en este caso será el lugol (el hará que la pared quede mejor fijada con el color primario.)

• Después agregamos el decolorante, si la bacteria es gram negativa por acción del etanol este eliminará el colorante primario quedando la bacteria sin color.

• Por último agregamos luego de lavar el colorante secundario que será la '''Safranina'', en caso de presenciar una bacteria gram negativa las colonias se teñirán de un color rosado intenso.

Esperamos unos 2 minutos dependiendo de la concentración de nuestros colorantes y luego miraremos el frotis en el microscopio. Primero con objetivo de x40 para observar las colonias gram positivas (basta con ese) mientras que si estamos en presencia de colonias gran negativas y no podemos observarlas con claridad, entonces nos iremos con el objetivo de inmersión siempre y cuando coloquemos aceite de inmersión para no dañar el microscopio. Esto fue todo por la clase de hoy, te espero en la proxima lección.

_{Final de la lección 2, Fotografía de mi Galería personal.}

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Estoy otorgando 3 Steem Power a los 2 mejores comentarios cada semana (no los mas largos) si deseas participar no dudes en dejar tu comentario con algún aporte adicional o simplemente con un comentario positivo sobre la lección. ♥ Los ganadores de la semana pasada fueron @pandora2010 y @loolluv, sigamos aprendiendo!

_{Fotografía de mi Galería personal.}